相同浓度的h和姜黄素在不同时间作用于细胞,用高效液相色谱法检测细胞内总胆固醇。结果表明,姜黄素能降低血管平滑肌细胞来源的脂质承载细胞中总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量,这种作用与上调srebp-蛋白表达有关。
2体内实验方法
2.1高脂肪乳剂及饲料模型万里等研究了脂肪乳剂的最佳制备(配方:猪油20 g,胆固醇10 g,丙基硫氧嘧啶1 g,吐温-80 20 ml,丙二醇
20 ml,10%脱氧胆酸钠水溶液20 ml,并加入蒸馏水至100。
酶比色法测定模型组和正常组血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)。结果:模型组与正常组相比,总胆固醇和甘油三酯有显著性差异。说明这种方法是可行的。
给刘全良等人喂以高脂饲料(配方:基础饲料77.5%,胆固醇2%,猪油10%,蛋黄粉10%,去氧胆酸钠0.5%)建立小鼠高脂血症模型,并给予含等量总黄酮的不同纯度山楂叶样品。
测定小鼠血清TC、TG值。结果表明,不同纯度的山楂叶总黄酮样品均有明显降低高脂血症小鼠TC和TG的作用。高脂乳剂及饲料模型中报道的造模时间相差较大,可能原因是两者的配方差异较大及灌胃方式不同所致。根据作者的研究情况,小鼠造模时间相对较长,不易成功;而兔造模时间相对较短,易成功。可能原因是小鼠的自我调节能力相对较强,被吸收的胆固醇在体内可以较快的进行代谢、转运。
2.2 蛋黄乳液模型 刘凯等进行了大鼠高胆固醇血症快速造型法初筛降脂中草药的研究,大鼠腹腔注射75%蛋黄乳液(新鲜鸡蛋,取蛋黄用消毒生理盐水配成75%乳液),24 h血清TC达到峰值,即复制出高胆固血症模型。大槐合剂组各鼠TC值,与造模组比较差异有统计学意义,与传统造型方法所得到的结果相同。
李亚红等研究了丹皮酚、山楂黄酮不同剂量配伍对高脂血症小鼠血清TC的影响,采用小鼠腹腔注射75%蛋黄乳液造模,用终点法试剂盒测定血清TC含量。结果表明,丹皮酚与山楂黄酮以2:1的比例配伍具有明显的降低血清TC作用。
杨晓泉等采用75%蛋黄乳诱导小鼠高胆固醇血症,研究柚皮中黄酮化合物对小鼠血脂的影响。结果,柚皮黄酮化合物能显著降低小鼠血清的TC、TG和LDL-C的浓度,并提高HDL-C浓度。
蛋黄乳液模型具有操作简便、快速,且造模周期短、易成功的特点。腹腔中的腹膜表面积大,密布血管和淋巴管,吸收能力特强,血清胆固醇的升高可能是由于外源性胆固醇的迅速吸收所致。
2.3 其它模型 其它常用的降血脂动物模型还有Triton WR-1339(表面活性剂)尾静脉注射法。从尾静脉注射Triton WR-1339盐水溶液给大鼠,注射后立即停止喂食,并持续饥饿,被检测的大鼠在注射Triton后分几次给药,在注射Triton 24 h后取肝和血浆测总胆固酵和三酰甘油,用于对评价样品降血脂的效果。
影像学研究也可揭示药物在延缓和逆转颈动脉粥样硬化病变进展方面的疗效。主要是通过超声检测颈动脉内膜中层厚度(inteima-media thickness,IMT)来判断药物疗效,该方法越来越受到人们的重视。
3 结语
高脂血症引发的心脑血管类疾病是危害人类健康的三大疾病之一,寻找有效、安全的降脂药物成为当前研究的热点,降血脂实验方法的发展为药物的筛选提供了新的思路,拓展了研究领域。降血脂药物的筛选具有重大的现实意义与广泛的应用前景,本文简要介绍的国内外资料具有一定的参考价值。